图2 pH对ΔIRLS的影响Fig.2 Effect of buffer pH on ΔIRLSMSN:0.164 mg/L;BASB:2.0×10-5mol/L.

2.2.2 BASB用量或浓度室温下，取1.00 mL MSN标准工作液、1.50 mL pH=9.25 B-R缓冲溶液，考察0.50～4.00 mL BASB溶液对MSN与BASB以静电引力结合生成的缔合物的ΔIRLS的影响，见图3。曲线表明，当BASB的用量在2.80～3.20 mL范围内(或体系溶液中BASB的浓度在2.8×10-5～3.2×10-5mol/L范围内)时，ΔIRLS相对较大，实验选用灵敏度最佳的BASB用量3.00 mL或体系溶液中最佳BASB浓度3.0×10-5mol/L。

图3 BASB浓度对ΔIRLS的影响Fig.3 Effect of BASB concentration on ΔIRLSMSN:0.164 mg/L;B-R:pH=9.25,1.50 mL.

2.2.3 试剂加入顺序室温下，取1.00 mL MSN标准工作液及上述选定条件下的B-R缓冲溶液和BASB溶液，考察他们的加入顺序对MSN与BASB以静电引力结合生成的缔合物的ΔIRLS的影响。实验表明，ΔIRLS相对最大的试剂加入顺序为：MSN溶液、B-R缓冲溶液、BASB溶液。故实验选择用最佳的试剂加入顺序进行各项实验。

2.2.4 时间及稳定性室温下，取1.00 mL MSN标准工作液，在上述选定实验条件下，考察MSN与BASB的反应时间对其以静电引力结合生成的缔合物的ΔIRLS的影响。实验表明，MSN与BASB的静电相吸作用在20 min内，随着反应的进行，ΔIRLS逐淅增大，20～80 min内，ΔIRLS达最大且基本不变。由此说明，MSN与BASB的反应在20 min内可进行完全，稳定时间至少1 h。故实验选在20 min后进行测定。

2.3 ΔIRLS与MSN的关系

分别取MSN标准工作液0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00 mL于10 mL具塞比色管中，按选定的实验条件加入其它试剂溶液，再按1.3的方法测定标准系列溶液的RLS增强强度ΔIRLS。以ΔIRLS为纵坐标，MSN的质量浓度为横坐标，作ΔIRLS-c标准曲线。MSN在0.005～0.16 mg/L范围内与ΔIRLS呈线性关系，线性方程为：ΔIRLS=-15.79+5372c，相关系数r=0.9993，检出限为0.0046 mg/L。

2.4 共存物质的影响

室温下，考察了最佳条件下355 nm处，某些常见共存物质对测定MSN(0.164 mg/L)的影响。结果表明，当相对误差≤±5%时，下列共存物质不干扰MSN的测定：400倍的葡萄糖、麦芽糖、L-异亮氨酸、L-丙氨酸、L-赖氨酸、L-谷氨酸、L-白氨酸、L-组氨酸、甘氨酸；100倍的蔗糖、L-亮氨酸、L-色氨酸、尿素；60倍的倍的柠檬酸三钠、淀粉；20倍的牛磺酸。可知本方法有好的选择性。

2.5 样品测定

准确移取1.2下的1#待测液0.30 mL、2#待测液0.20 mL、3#待测液1.00 mL，按1.3的测定方法配制溶液并同步扫描RLS光谱，各做6份平行测定。根据谱图上RLS强度及回归方程即可求出各待测液中MSN的含量，从而求得原始MSN样品中MSN的含量。最后做3水平的加标回收试验，各水平做6份平行测定，依据实验结果即可判断方法的准确度和精密度。结果见表1。

表1 美司那样品分析结果及回收试验(n=6)Table 1 Analytical results of mesna samples and recovery tests(n=6)SampleNominal(mg/branch)Measured value(mg/branch)Added(10-4 mg)Found(10-4 mg)Recovery(%)RSD(%)1#.#.645..54.928..08.2012..33#--

-:notdetected.

3 结论

用本文建立的瑞利光散射法测定美司那，简便、快速并有高的灵敏度(4.8 ng/L)、准确度(回收率为98.3%～102%)和精密度(RSD为1.8%～2.5%)，满足痕量分析要求。样品处理简单、安全，所用仪器为普通荧光分光光度计易于普及，所用试剂为一般的分析纯易于采购。本方法可用于市售MSN药物及人体血液样品中MSN的定量分析。

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文章来源：《中国药物经济学》 网址: http://www.zgywjjx.cn/qikandaodu/2021/0503/820.html