1.3 制备原理

首先，采用毛细管共挤出技术和复凝聚法制备海藻酸钙-壳聚糖(AC)微胶囊[图1(a)、(b)]。在酸性水环境中，壳聚糖带正电荷、海藻酸带负电荷，带有相反电荷的这两种多糖通过静电作用与钙离子反应形成海藻酸钙-壳聚糖聚电解质复合物，可以提高海藻酸钙囊壁在较高pH 条件下的稳定性[8,17,29-30]。然后，AC 微胶囊[图1(b)、(e)]通过静电作用吸附精蛋白，制得海藻酸钙-壳聚糖/精蛋白(ACP)微胶囊[图1(c)、(f)]；最后，在精蛋白的调控下与硅酸钠反应，得到海藻酸钙-壳聚糖/精蛋白/二氧化硅(ACPSi)复合微胶囊[图1(d)、(g)]。仿生硅化可以进一步提高微胶囊的力学性能，抑制其在肠液pH 环境中的的溶胀行为[28]。其中，海藻酸和精蛋白分子间在不同pH 环境中的静电相互作用使囊膜渗透性能具有pH 响应特性：在胃液pH 条件下，精蛋白分子间由于静电排斥作用分散在海藻酸钙凝胶网络中，囊膜扩散渗透率低，囊壁为药物提供保护作用，微胶囊内负载的吲哚美辛不被释放；而在肠液pH 条件下，精蛋白分子由于与海藻酸钙分子间的静电吸附作用被吸附到海藻酸钙凝胶网络上，微胶囊扩散渗透率增大，吲哚美辛缓慢释放，从而实现微胶囊的肠靶向药物递送和控释性能。并且通过在囊壁中嵌入肠溶微球作为“微阀门”，利用肠溶微球在肠部pH 条件下的溶解特性，为药物释放提供更多“微通道”，以更好地控制药物的释放速率。

图1 利用毛细管共挤出装置制备ACPSi复合微胶囊的示意图Fig.1 Schematic illustration of the process for preparation of Ca-alginate-based capsules by co-extrusion device(a)共挤出装置;(b)海藻酸钙-壳聚糖复凝聚;(c)精蛋白吸附;(d)仿生硅化;(e)AC微胶囊;(f)ACP微胶囊;(g)ACPSi复合微胶囊

1.4 肠溶微球的制备与表征

肠溶微球是利用自制的微流控装置结合乳化溶剂扩散法制备的。内相流体(IF)：称取0.14 g HPMCP 溶于20 ml 二氯甲烷与乙醇的混合溶剂(9∶1，体积比)中，溶解制得油相，流速为500 μl/h。外相流体(OF)：含有0.6%(质量) SDS 的水溶液，流速为1400 μl/h。接收液为去离子水，制备过程中每1 h换一次接收液。待微球完全反应成形后，用少量去离子水洗涤三次，60°C 下干燥6 h 后得到干燥肠溶微球。

利用光学显微镜观察微球形态，利用SEM 观察肠溶微球的微观结构。为验证微球的肠溶特性，将一定量的干燥微球分别分散于pH 2.5和pH 6.8的磷酸缓冲液中，在光学显微镜下观察微球在不同pH条件下形态和粒径随时间的变化。

1.5 肠靶向ACPSi复合微胶囊的制备

基于毛细管共挤出技术结合静电吸附和仿生硅化的方法，制备ACPSi复合微胶囊。首先，利用毛细管共挤出装置制备AC 微胶囊。IF 为1%(质量)的CMC 水溶液，流速为20 ml/h；OF 为含有2%(质量)Na-Alg 和0.2%(质量) SDS 的水溶液，流速为15 ml/h；内外相流体通过共挤出装置逐滴滴入含有10%(质量) Ca(NO3)2和0.2%(质量)壳聚糖的1%(体积)醋酸水溶液中，装置管口距液面高度约5 cm。液滴滴入接收液数秒后即形成AC 微胶囊。然后，将AC 微胶囊加入到浓度为2 mg/ml 的硫酸鱼精蛋白水溶液中，以200 r/min 速度机械搅拌30 min，带正电的精蛋白分子被吸附在带负电的海藻酸钙凝胶网络中，得到ACP 微胶囊。最后在相同搅拌速度下，将ACP微胶囊转移到由0.2 mol/L 冰醋酸溶液配制的浓度为60 mmol/L 的硅酸钠溶液中，此时硅酸钠呈电负性，和微胶囊表面带正电的精蛋白分子发生静电吸附，机械搅拌1 h 后制备得到ACPSi 复合微胶囊，用0.2 mol/L 的冰醋酸溶液洗涤三次后于4°C 条件下保存备用。通过在IF 中加入模型药物，可以制备得到包载药物的ACPSi复合微胶囊；通过在OF中加入肠溶微球，可以制备得到囊壁嵌有肠溶微球的ACPSi复合微胶囊。

1.6 肠靶向ACPSi复合微胶囊的结构表征

利用SEM 对冻干后的ACPSi 复合微胶囊的微观结构进行表征；利用数码相机拍照对ACPSi 复合微胶囊的整体外观形貌进行表征，并利用统计分析软件计算微胶囊的平均粒径，并根据式(1)计算粒径偏差系数(CV)值

式中，Di为第i 个微胶囊的直径；N 为微胶囊的个数为微胶囊直径的平均值。

1.7 肠靶向ACPSi复合微胶囊的稳定性能研究

利用万能材料测试机对硅化前后的ACP 微胶囊和ACPSi 微胶囊进行抗压实验，研究微胶囊在受到挤压直到囊壁破损的这一过程中应力应变的变化规律，从而研究复合微胶囊的抗压性能。将ACPSi 复合微胶囊置于pH 2.5 的磷酸缓冲液中，3 h后，将其转移到pH 6.8 的磷酸缓冲液中，期间定时用数码相机拍照，并用统计分析软件计算微胶囊在不同时刻的粒径变化，从而分析微胶囊在不同pH缓冲溶液中的溶胀性能。

文章来源：《中国药物经济学》 网址: http://www.zgywjjx.cn/qikandaodu/2021/0503/817.html